實時熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）也稱 QPCR，是指在DNA 擴增反應中，以熒光化學物質測單次聚合酶鏈式反應（PCR）循環(huán)后產物總量的方法。

實時熒光定量PCR儀主要由樣品載臺、基因擴增熱循環(huán)組件、微量熒光檢測光學系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計算機及應用軟件組成。其中基因擴增熱循環(huán)組件工作原理與傳統(tǒng)基因擴增儀大致相同，不同廠家不同型號的產品分別采用空氣加熱、壓縮機制冷、半導體加熱制冷等工作方式。微量熒光檢測系統(tǒng)由熒光激發(fā)光學部件、微量熒光檢測部件、光路、控制系統(tǒng)組成。

常用的熒光激發(fā)方式有兩種：鹵鎢燈和LED；熒光檢測元件常用兩種方式：光電倍增管和冷光CCD攝像機，光單色元件有濾光片和光柵。在實時PCR擴增過程中，熒光信號被收集，轉化為成為擴增和熔解曲線。具體數(shù)據(jù)就是基線，熒光閾值和Ct值。